심오한 내용입니다. (19+)

제가 갔던 perio-implant summer school에서 microbacteria의 역활에 대해(periodontitis에서)
한참 강의가 있었는데 어느 분이 갑자기 gram+ 와 - 의 차이점이 무언지하고 질문하시더군요...
개인적으로 대충 bacterial cell wall이 착색을 다르게 한다고 알고는 있었지만 자세한 내용은
"잊어버렸습니다"('몰랐다'라고 실토??..^^)
열대야에 잠은 안오고, 해서 옛날 교과서를 뒤져보았습니다.
생각보다 재미있는 내용이더군요.
저처럼 "잊어버리신" 분들을 위해 올립니다.(^*^)
...

Gram- staining 은 Gram이란 사람에 의해 개발되었는데 염증이 생긴 상처에서 박테리아를  
선별하기위해 고안되었다는군요.

방법은

1. smear를 가열 고정
2. crystal violet 으로 1분간 cover
3. 물로 세척. 닦지 않음.
4. Gram's iodine 으로 1분간 cover
5. 3번 반복
6. acetone(30ml) 와 alcohol(70ml)에서 약하게 저어주며(agitate) 10~30초간 탈색
7. 5번 반복
8. safranin(95% alcohol에 2.5% 용액) 으로 10~30초 cover
9. 7번 반복 후 건조.

..입니다.

6번의 탈색 과정에서 gram(-)는 탈색되고 gram(+)는 안된다는군요.

그들의 차이는 bacterial cell wall에 있는데 :

gram(+) 는 cell wall이 주로 Teichoic and teichuronic acid 와 sometimes polysaccharides 로 이루어져있고,

gram(-) 는 lipoprotein, outer membrane, lipopolysaccharide(LPS) 로 되어있다.

이들 cell wall의 요소는 잘 알려져 있으나 gram(+) 의 cell wall이 왜 탈색이 안 되는지에대해서는 아직 알려진것이 없다.
(..라고 책에서 이야기 하는데 이 책이 1989년 거라서요,,-.-;)

gram(-) 가 나쁜 이유는 outer membrane 의 단백질화된 구멍들이 low molecular weight
들은 잘 통과시키는 반면에 큰 molecular weight을 가진 antibiotic은 통과속도를 늦추므로 gram(+)에
비교해서 high antibiotic resistance를 보이고,

또한 LPS 는 lipid-A라는 complex lipid에 polysaccharide 가 결합되어 있는 형태로,
bacteria cell 이 lysis 되면 따로 떨어져서 lipid-A는
동물에게 아주 강한 toxin (gram-의 endotoxin 이라 불린다) 이고,
polysaccharide는 surface antigen (주 명칭:O-antigen)으로 행동한다. .
[구강내 염증의 주 원인이 gram(-)인 이유가 여기에..!!!]
살모넬라균에는
밝혀진것만도 1000가지 이상의 antigen이 있답니다

gram(+)도 staining한 후 세척하기전에 cell wall을 없애면, 탈색 가능하다고 합니다.
(방법은 나와 있지 않았습니다. 한번 해볼라 그랬는데..)


여기 까지 입니다.

주말에 남편이 G-/+ 인지 한번 해 보겠습니다.^-^